Linfocitos T (Grupo: Los Anticuerpos)

Linfocitos T

MADURACION DE LAS CELULAS T

Desarrollo del timo:

El estroma tímico surge al inicio del desarrollo embrionario a partir de capas ectodérmicas y endodérmicas procedentes del tercer bolsillo faríngeo y de la tercera hendidura branquial. Estas dos estructuras se invaginan, y se cierran, y las dos capas quedan superpuestas, de modo que la ectodérmica rodea a la endodérmica, formando el llamado rudimento tímico.

	·                     La capa ectodérmica formará los tejidos epiteliales corticales del timo.
	·                     La capa endodérmica formará los tejidos epiteliales medulares.
	·                     En su corteza encontramos sólo timocitos en fases tempranas de su maduración, junto con algunos macrófagos, dentro del estroma cortical a base de células corticales epiteliales.
	·                     En la médula encontramos timocitos en fases más avanzadas de maduración con células dendríticas y macrófagos, todos inmersos en un estroma medular a base de células epiteliales medulares.

Rutas de desarrollo en el linaje de las células T

El primer marcador de superficie en aparecer (en ratón) es el Thy-1 (equivalente al CD2 de humanos), que ya no se pierde (por lo tanto, se trata de un marcador que caracteriza al linaje de T). Estas células Thy-1⁺ CD4^- CD8^- (dobles negativas) pueden escoger dos vías alternativas:

1.                En una de las dos rutas, las células hacen reordenaciones productivas de λ  y   y expresan CD3 en su membrana. Suponen sólo <1% de los timocitos. Son las primeras en aparecer: se detectan al día 14 de gestación, pero desaparecen al nacimiento.

2.                La mayoría escoge una vía alternativa, que discurre de la siguiente manera:

día 16º: Las células reordenan genes de cadenas b. Si no se logran reordenaciones productivas, entran en apoptosis. Si la reordenación es productiva, la cadena b se asocia con la llamada cadena a sustitutiva (una especie de "pseudo-a", o cadena a de pre-T, que se abrevia pTa), generando el receptor pTa:b (junto con CD3). Este receptor induce la proliferación celular y la coexpresión de CD4 y CD8: de este modo aparecen los timocitos grandes doble positivos.

Día 17º: CD4+ CD8+ TCR-2+ (a b ) CD3+. Se trata de los pequeños timocitos dobles positivos, que dejan de dividirse. Estas células ya provistas del complejo receptor específico van a ser sometidas, hasta la época del nacimiento (en que alcanzan sus máximos niveles), a selección positiva y negativa:

-	selección positiva: sobreviven aquellas células que tengan TCR capaces de reconocer MHC-I o MHC-II de células epiteliales del timo. Con ello se garantiza la restricción por propio haplotipo de las células T.
	-selección negativa: de aquellas células que han pasado la selección positiva mueren por apoptosis las que posean TCR que reconozcan con alta afinidad péptidos propios enclavados en el MHC o MHC propio solo. Ello tiende a garantizar la propiedad de autotolerancia por eliminación de los linfocitos T autorreactivos.

Localización intratímica de las diversas fases madurativas:

	Los timocitos doble negativos se localizan en la zona subcapsular de la corteza.
	Los pequeños timocitos dobles positivos se localizan en la corteza.
	Los timocitos maduros CD4+ y CD8+ se ubican en la médula.
	En la corteza, las células epiteliales corticales establecen contactos por sus largos procesos de membrana con los timocitos.   Selección tímica positiva y negativa En ambos procesos selectivos parecen jugar un papel importante las células del estroma tímico: células epiteliales tímicas, macrófagos y células dendríticas; todas ellas expresan en sus membranas grandes niveles de moléculas MHC-I y/o MHC-II. Los timocitos inmaduros dobles positivos (CD4+CD8+ TCR+ CD3+) interaccionan, por mecanismos aún oscuros, con estas células estromales, lo que conduce a la selección positiva y negativa. En la selección positiva se da interacción de los timocitos con células epiteliales corticales del timo (Las células corticales epiteliales van provistas de largos procesos de membrana que permiten contactos simultáneos con varios timocitos).  De los timocitos que sobreviven a la selección positiva algunos llevan TCR de baja afinidad hacia auto-péptidos presentados por MHC, y otros llevan TCR con alta afinidad hacia auto-péptidos presentados por ese MHC: estos últimos sufren selección negativa, que ocurre en la zona de transición cortico-medular y en la médula tímica, y en la que las células dendríticas y los macrófagos interaccionan con los timocitos portadores de TCR de alta afinidad hacia {autopéptidos-MHC} o hacia MHC solo. La selección positiva también regula otros dos fenómenos en los que no nos vamos a detener: Regulación de reordenaciones de cadenas . La selección positiva también regula la expresión del correceptor (CD4 o CD8) en las células maduras (es decir, el hecho de que dejan de ser doble positivas para convertirse en CD4+ o CD8+). ACTIVACIÓN DE LOS LINFOCITOS T COADYUVANTES La activación y expansión clonal de TH es un acontecimiento central en la producción de las respuestas inmunes específicas (tanto la humoral como la celular). Se trata de un proceso complejo que en los últimos años está siendo paulatinamente desentrañado. Rutas de señalización intracelular El TCR tiene colas citoplásmicas cortas que por sí mismas son incapaces de señalización intracelular. Una vez que dicho TCR se une al péptido: MHC, esta señal se transduce al interior de la célula T por medio de los dominios citoplásmicos de CD3, el correceptor CD4 y varias moléculas accesorias (CD2, CD45). Dicha transducción de señal se realiza por medio de una serie de proteín-quinasas y proteín-fosfatasas. Algunas enzimas de la ruta de señalización 1) Proteína p56lck Se trata de una proteín-quinasa que se une a membrana mediante ácido mirístico engarzado a la glicocola en posición 2 (Gly2). Posee dos secuencias homólogas con otras proteínas (SH2 y SH3). 2) Proteína p59 fyn Su estructura es muy parecida a la de p56lck. También se encuentra anclada a la membrana por miristilación. Igualmente posee una Tyr cerca del extremo carboxi-terminal, que cuando está fosforilada hace que la p59fyn esté inactiva, y otro sitio Tyr capaz de recibir fosfato por autofosforilación de esta quinasa, lo cual hace que la proteína pueda fosforilar a otras proteínas. Está físicamente asociada a cadenas x del CD3.   Fosforilasa ZAP-70 No está asociada por miristilación a la membrana. Contiene una Tyr capaz de autofosforilarse, pero a diferencia de las proteínas de la familia src, carece de Tyr de regulación negativa. En las células T en reposo, la ZAP-70 no se encuentra asociada al complejo TCR-CD3; sin embargo, cuando se inicia el proceso de activación celular, y una vez que las cadenas x y e de CD3 quedan fosforiladas por otras proteín-quinasas, la ZAP-70, por medio de sus dominios SH2 se une a estas cadenas fosforiladas, y entonces queda activada en su capacidad de fosforilasa.   Fosfatasa CD45 (=LCA=T200) El CD45 es en realidad una familia de fosfatasas específicas de tirosina, que aparecen en todas las células del linaje hematopoyético excepto en los eritrocitos. Existen varias isoformas, de entre 180-200 kDa, que proceden de procesamiento alternativo de un mismo tipo de ARN, y cada una de ellas aparece en determinados tipos celulares. Por ejemplo, CD45RA aparece en T vírgenes mientras que CD45R0 en T cebados. Tiene un dominio extracelular, que está glucosilado; se une a la CD22. A) Ruta del inositol-trifosfato (IP3): 1.                El IP3 se une a un receptor específico situado en el REr, provocando la salida al citoplasma de grandes cantidades de Ca++, y junto con IP4provoca también la entrada desde el exterior celular, a través de canales de calcio de la membrana citoplásmica, de más cantidades de este catión. 2.                El aumento intracelular de Ca++ estimula a la enzima calmodulina, que es una serín/treonín-quinasa. 3.                La calmodulina activada activa a su vez a la calcineurina, que es una fosfatasa. 4.                La calcineurina activada cataliza la desfosforilación del factor NF-AT citoplásmico fosforilado (NF-ATc-P). 5.                Una vez desfosforilado, el NF-AT emigra al núcleo, donde se junta con el factor nuclear AP1, formando entrambos un factor de activación transcripcional de varios genes, entre ellos el que codifica la citoquina IL-2. Aparte de esta secuencia de acontecimientos, los altos niveles citosólicos de Ca++ pueden estimular igualmente a la proteín-quinasa C (PKC) y la quinasa MAP-II. B) Ruta del diacilglicerol (DAG): 1.                El DAG estimula, junto con el Ca++, a la proteín-quinasa C (PKC), que hasta ese momento residía en el citoplasma. 2.                Al activarse, la PKC emigra a la cara interna de la membrana citoplásmica; allí, en presencia de los fosfolípidos, ejerce su función como serín/treonín-quinasa: Ø Fosforila una amplia variedad de proteínas, entre las cuales se encuentra la codificada por el protooncogén ras. La proteína Ras a su vez inicia otra cascada de fosforilaciones que llega hasta las quinasas MAP. Estas quinasas parece que emigran al núcleo, donde activan por fosforilación a factores de transcripción: c-fos y c-jun se unen para formar el ya citado AP1, que se une solo o junto con NF-AT, reconociendo en cada caso secuencias específicas de la zona promotora/intensificadora de ciertos genes. Ø Otra de las consecuencias de la actividad PKC es que se fosforila el componente inhibidor del factor NF-k B que estaba retenido en el citoplasma.Al fosforilarse, el componente inhibidor queda a merced de unas proteasas, que lo degradan. Es entonces cuando el NF-k B puede emigrar al núcleo y unirse a secuencias específicas del promotor del gen de IL-2 y de otros genes.            Activacion Genica  Tras la interaccion del linfocito Th con el peptido elevado en el surco de MHC-11 de una celula presentadora de antigeno,se pone en marcha unas rutas que conduce a la activacion de una serie de genes.Los genes que se activan se pueden clasificar segun el momento relativo de su expresion en tres categorias: Genes de expresion inmediata pero estos genes no se activansino sus productos. Genes de expresion temprana. Genes de expresion tardia.                                                                                              Anergia Clonal La union de un linfocito Th con un complejo peptido MHC11 de una celula presentadora de antigeno puede conducir a dos tipos de respuestas opuestas:      Activacion y expansion clonal      Anergia clonal La anergia clonal es la incapacidad proliferativa de un linfocito tras un contacto con el complejo peptido MHC y se debe a la carencia de la senal coestimulada proporcionada por la interaccion entre CD28del linfocito Th y b7 de la APC. Poblaciones perifericas de Celulas T Maduras Un 90-95% de las células T periféricas son de tipo alfa/beta (TCR-2), existiendo una proporción de CD4+ doble que las CD8+. En general, las CD4+ funcionan como células T cooperadoras (TH) y las CD8+ lo hacen como T citotóxicas (TC), aunque parece que ambas poblaciones expresan el mismo repertorio de segmentos variables (Valfa y Vbeta). La población circulante (periférica) de células T consiste en T vírgenes, T efectoras y T memoria. Linfocitos T Virgenes Las células T CD4+ y T CD8+ vírgenes inmunocompetentes que acaban de madurar abandonan el timo y entran en circulación en un estado de reposo (G0 del ciclo celular). Se caracterizan por: - Bajos niveles de moléculas de adhesión - Altos niveles del receptor de alojamiento (homing) llamado L-selectina, que les permite unirse a la dirigina (addressin) vascular de las vénulas de endotelio alto (HEV) de los ganglios linfáticos. Esto permite la extravasación del linfocito virgen hasta el interior del ganglio a partir de la circulación. - Expresan la isoforma de alto peso molecular de CD45 (llamada CD45RA), implicada en la transducción de la señal de activación. Linfocitos T efectores Las células T efectoras pueden ser de tres tipos funcionales diferentes: - TC que suelen ser fenotípicamente CD8+. Las Tc efectoras se suelen denominan linfocitos T citolíticos (CTL), y su célula objetivo es una célula diana, es decir, una célula propia nucleada infectada intracitosólicamente. - TH1 que suelen ser fenotípicamente CD4+. Las TH1 (inflamatorias) tienen como objetivo a macrófagos que ya contienen en sus vacuolas algún parásito. El efecto de la unión al macrófago será su activación, que le ayudará a eliminar al invasor. - TH2 que suelen ser fenotípicamente CD4+. Son denominadas T colaboradoras, especializadas en secretar ciertas citoquinas que son esenciales en la activación de células B para que éstos se activen, proliferen y se diferencien hasta células plasmáticas secretoras de anticuerpos. Las T efectoras comparten una serie de importantes caracteres que las distinguen de las T vírgenes. Linfocitos T de memoria: Estás células de memoria estan preparadas para responder de un modo más rápido e intenso cuando se vuelvan a encontrar con el antígeno (en la respuesta secundaria). Ello se debe en parte a que poseen menores requerimientos para ser activadas.  UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DE SANTIAGO Materia: Inmunología (Med-882-001) Tema: Citoquinas Grupo: Los Anticuerpos (04) Integrantes: Malbery Cerda 1-09-0048 Danisa Betances 1-10-1785 Clean C. Desir 1-11- 1396 Roseilene Rugene 1-11-1007 Sherly Metalus 1-11-2478 Kathyana SF Louis 2-10-0556 Robennson Tussain  1-11-1882 Marlie Jean 1-11-1861 Magdolony Guerrier 1-11-1313 Andy Paul 1-11-1130 Profesora: Mirtha Villar